真核微生物的形态，构造和功能

真核微生物的形态，构造和功能

★4　什么是单细胞蛋白？为什么酵母菌是一种优良的单细胞蛋白？

答：单细胞蛋白又叫微生物蛋白、菌体蛋白。按生产原料不同，可以分为石油蛋白、甲醇蛋白、甲烷蛋白等；按产生菌的种类不同，又可以分为**蛋白、**蛋白等

因为酵母菌的维生素、蛋白质含量高，个体一般以单细胞状态存在，能发酵糖产生能量常生活在含糖较高，酸度较大的水生环境中。

★7 霉菌的营养菌丝和气生菌丝各有何特点？它们分别可分化出哪些特化构造。

答：当其孢子落在固体培养基表面并发芽后，就不断伸长，分枝并以放射状

向内层扩展，形成大量色浅，较细的具有吸收营养和排泄代谢废物功能的基内菌丝又称营养菌丝。同时在其上又不断向空间方向分化出颜色较深，直径较粗的分枝菌丝，叫气生菌丝。气生菌丝分化成孢子丝。

★10 **，放线菌，酵母菌和霉菌四类微生物的菌落有何不同？为什么？
答：酵母菌菌落一般较**菌落大且厚，表面湿润，粘稠，易被挑起，多为乳白色，少数呈红色。霉菌菌落由粗而长的分枝状菌丝组成，菌落疏松，呈绒毛状、絮状或蜘蛛网状，比**菌落大几倍到几十倍，有的没有固定大小

放线菌菌落能产生大量分枝和气生菌丝的菌种（如链霉菌），菌落质地致密，与培养基结合紧密，小而不蔓延，不易挑起或挑起后不易破碎。

不能产生大量菌丝体的菌种（如诺卡氏菌）粘着力差，粉质，针挑起易粉碎，**的菌落一般呈现湿润，较光滑，较透明，较粘稠，易挑取，质地均匀以及菌落正反面或边缘与中央部位的颜色一致。

**属单细胞生物，一个菌落内无数细胞并没有形态，功能上的分化，细胞间充满着毛细管状态的水。多数放线菌有基内和气生菌丝的分化，气生菌丝成熟时又会进一步分化成孢子丝并产生成串的干粉状孢子，它们伸展在空间，菌丝间没有毛细管水积存。酵母菌的细胞比**的大，细胞内有许多分化的细胞器，细胞间隙含水量相对较少，以及不能运动等特点。霉菌的细胞呈丝状，在固体培养基上生长时又有营养和气生菌丝的分化，气生菌丝间没毛细管水。则不同。

★11为什么说蕈菌也是真核微生物？
答：从进化历史，细胞结构，早期发育特点，各种生物学特性和研究方法等方面来考察，都可以证明它们与其他典型的微生物——显微**却完全一致。事实上，若将其大型子实体理解为一般**菌落在陆生条件下的特化与高度发展形式，蕈菌就与其他**无异了。

★12什么叫锁状联合？其生理意义如何？试图示其过程。
答：锁状联合即形成状突起而连合两个细胞的方式不断使双核细胞分裂，从而使菌丝**向前延伸。

★13试比较**，放线菌，酵母菌和霉菌细胞壁成分的异同，并讨论它们的原生质体制备方法。
答：**细胞壁主要成分为肽聚糖，具有固定细胞外形和保护细胞不受损伤。

**原生质体的制备：溶菌酶（lysozyme）、自溶酶（autolyticenzyme），酵母菌细胞壁主要成分甘露聚糖（mannan），（外层）；蛋白质（protein）（中层）；葡聚糖（glucan）（内层）类脂，几丁质，●酵母原生质体的制备：EDTA-α-巯基乙醇 蜗牛消化酶

放线菌和霉菌的细胞壁主要成分微纤维（microfibril）纤维素、几丁质

无定形基质成分：葡聚糖、蛋白质、脱乙酰几丁质、甘露聚糖、少量脂类无机盐等。

第三章 病毒 亚病毒

 

★⒉病毒粒有哪几种对称形式？每种对称又有几种特殊外型？

有螺旋对称、二十面体对称、复合对称，每种对称形式又有有包膜和无包膜之分。

★⒊什么叫烈性噬菌体？简述其裂解性生活史。

能在短时间内完成吸附、侵入、增殖、成熟和裂解5个阶段，而实现其繁殖的噬菌体成为烈性噬菌体。它的裂解生活史大致为：1尾丝与宿主细胞特异性吸附2病毒核酸侵入宿主细胞内3病毒核酸和蛋白质在宿主细胞内的复制和合成4病毒核酸和蛋白质装配5大量子代噬菌体裂解释放到宿主细胞外

★⒋什么是效价？试简述噬菌体效价的双层平板法。

效价表示每毫升试样中所含有的具有侵染性的噬菌体粒子数。

双层平板法主要步骤：预先分别配制含2%和1%琼脂的底层培养基和上层培养基。先用底层培养基在培养皿上浇一层平板，待凝固后，再把预先融化并冷却到45℃以下，加有较浓的敏感宿主和一定体积待测噬菌体样品上层培养基，在试管中摇匀后，立即倒在底层培养基上铺平待凝，然后在37℃下保温。一般经10余h后即可对噬菌斑计数。

★⒌什么是一步生长曲线？它分几期？各期有何特点？

定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线，称为一步生长曲线。

它包括

1潜伏期：细胞内已经开始装配噬菌体粒子并可用电镜观察到

2裂解期：宿主细胞迅速裂解溶液中噬菌体粒子急剧增多。

3平稳期：感染后的宿主细胞已全部裂解，溶液中的噬菌体效价达到*高点。

★⒎什么的病毒多角体？它有何实际应用？

多种昆虫病毒可在宿主细胞内形成光镜下成多角形的包含体，称为多角体。

可以制作生物杀虫剂

第四章 微生物的营养

★1、什么叫碳源？试从元素水平、分子水平和培养基水平列出微生物的碳源谱。

一切能满足微生物生长繁殖所需碳元素的营养物称为碳源。碳源谱见下图：

类型 　　元素水平    　化合物水平   　　　　　　培养基原料水平

有机碳       C H O NX         复杂蛋白质、核酸等　　　牛肉膏、蛋白胨、花生饼粉等

         　　　　C H ON      　多数氨基酸、简单蛋白质等    　　一般氨基酸、明胶等

         　　　　C H O　糖、有机酸、醇、脂类等       　葡萄糖、蔗糖、各种淀粉、糖蜜等

         　　　　CH     烃类 天然气、石油及其不同馏份等

无机碳       C O  　　　　　　二氧化碳       　　　　　　　　二氧化碳

         　　　　C O X　　　　碳酸盐等     　　　　　白垩、碳酸氢钠、碳酸钙等

★2、什么是氮源？试从元素水平、分子水平和培养基水平列出微生物的氮源谱。

　凡能提供微生物生长繁殖所需氮元素的营养源，称为氮源。微生物的氮源谱如下；

类型 元素水平  　　化合物水平        　　　　　　　培养基原料水平

有机氮       N C H OX        复杂蛋白质、核酸等　　牛肉膏、酵母膏、饼粕粉、蚕蛹粉等

         　　　　N C HO       　尿素、一般氨基酸、简单蛋白质等尿素、蛋白胨、明胶等

无机氮       N H　　　　　　氨、铵盐等   　　　　　　　　　硫酸铵等

         　　　　NO    　　　　　硝酸盐等 　　　　　　　　　硝酸钾等

        　　　　N        　　　　　　　　氮气       　　　　　　　　　　空气

★3、什么是氨基酸自养微生物？试举一些代表菌，并说明其在实践上的重要性。

　不需要利用氨基酸做氮源，能把尿素、铵盐、硝酸盐、甚至氮气等简单氮源自行合成所需要的一切氨基酸，为氨基酸自养微生物。如根瘤固氮菌，能直接利用空气中的氮气合成自身所需的氨基酸，直接或间接地为人类提供蛋白质。

★4、什么叫生长因子？它包括哪几类化合物？微生物与生长因子有哪几类关系？举例并加以说明。

　生长因子是一类调节微生物正常代谢所必需，但不能用简单的碳、氮源自行合成的有机物。广义的生长因子包括维生素、碱基、卟啉及其衍生物、甾醇、胺类、C4~C6的分支或直链脂肪酸，有时还包括氨基酸营养缺陷突变株所需要的氨基酸在内，而狭义的生长因子一般仅指维生素。生长因子与微生物的关系有以下3类：

（1）生长因子自养型微生物，它们不需要从外界吸收任何生长因子，多数**、放线菌和不少**，如E.coli等。

（2）生长因子异养型微生物，它们需要从外界吸收多种生长因子才能维持正常生长，如各种乳酸菌、动物致病菌、支原体和原生动物等。

（3）生长因子过量合成型微生物，其代谢活动中，能合成并大量分泌某些维生素等生长因子的微生物，如各种生产维生素的菌种。

★5、什么叫水活度？它对微生物生命活动有何影响？对人类的生产实践的日常生活有何意义？

水活度表示在天然或人为环境中，微生物可实际利用的自由水或游离水的含量。其定量含义为：某溶液的蒸气压与纯水蒸气压之比。生长繁殖在水活度高的微生物代谢旺盛，在水活度低的范围内生长的微生物抗逆性强。了解各类微生物生长的水活度，不仅有利于设计培养基，而且还对防止食物的霉腐具有指导意义。

★6、什么叫单功能营养物、双功能营养物和多功能营养物？各举一例说明。
只具有一种营养功能的营养物称为单功能营养物，如光辐射能源；同时具有两种营养功能的称为双功能营养物，如铵根离子；同时具有三种营养功能的营养物称为三功能营养物，如氨基酸。

★7、什么叫基团位移？试述其分子机制。

指一类既需特异性载体蛋白的参与，又需耗能的一种物质运送方式。其机制分两步：（1）HPr被PEP激活，（2）糖经磷酸化而进入细胞内。

★8、什么是选择培养基？试举一例并分析其原理。
选择培养基是一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基，具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能，广泛用于菌种筛选等领域。如酵母富集培养基中的孟加拉红抑制**的生长而对酵母菌无影响，偏酸性的环境有利于酵母菌的生长。

★9、什么是鉴别培养基？试以EMB为例，分析其鉴别作用原理。
鉴别培养基是一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只须用肉眼鉴别颜色就能方便地从近似菌落中找到目的菌菌落的培养基。EMB培养基中的伊红和美蓝可抑制革兰氏阳性菌和一些难养的革兰氏阴性菌。产酸菌由于产酸能力不同，菌体表面带质子，与伊红美蓝结合从而有不同的颜色反应，可用肉眼直接判断。

★10、培养基中各营养要素的含量间一般遵循何种顺序？试言之。
在大多数化能异养微生物培养基中，除水分外，碳源含量*高，其后依次是氮源、大量元素和生长因子，它们间大体存在着十倍序列的递减趋势。

★11、什么叫碳氮比？试对5种分子式清楚的常用氮源按其含氮量的高低排一个顺序。
碳源与氮源含量之比即为碳氮比

氨气＞尿素＞***＞碳酸铵＞硫酸铵

★12、何谓固体培养基？它有何用途？试列表比较4类固体培养基。
固体培养基是一类外观呈固体状态的培养基，在科研和生产实践上用途很广，如可用于菌种分离、鉴定、菌落计数、检验杂菌、选种、育种、菌种保藏、生物活性物质的生物测定、获取大量**孢子，以及用于微生物的固体培养和大规模生产等。
名称
 
固化培养基
 
非可逆性培养基
 
天然固体培养基
 
滤膜
 

     组成特点
 
液体培养基中加入凝固剂
 
有血清或无机硅胶的培养基
 
由天然固态基质直接配制的培养基
 
一种坚韧且带有无数微孔的醋酸纤维薄膜
 

用途
 
科研及生产中培养微生物、分离、鉴定等
 
化能自养菌的分离纯化等
 
大量培养、工业化生产等
 
水中少量菌的计数等
 
第五章 微生物的代谢

★1.比 较 红 螺 菌 与 蓝 细 菌 光 合 作 用 的 异 同 。
红 螺 菌 进 行 光 合 作 用 , 是 走 环 式 光 合 磷 酸 化 的 途 径 产 生 ATP, 没有 氧 气 的 放 出。蓝细 菌 进 行 光 合 作 用 是 走 非 环 式 光 合 磷 酸 化 的 途 径 , 在 非 环 式 光 合 磷 酸 化 途 径 中, 能 光 解 水 , 有 氧 气 放 出 , 并 有 还 原 力 产生。                                                                                                                     

★2.合 成 代 谢 所 需 要 的 前 体 物 有 哪 些 ?
合成代谢所需要的前体物有：氨基酸、核苷酸、脂肪酸、UDP- 葡 萄 糖胺                                                                                                                                                                                                                                                    

★3.试 述 分 解 代 谢 与 合 成 代 谢 的 关 系
分 解 代 谢 为 合 成 代 谢 提 供 能 量 , 还 原 力 和 小 分 子 碳架                                    
合 成 代 谢 利 用 分 解 代 谢 提 供 的 能 量 , 还 原 力 将 小 分 子 化 合 物 合 成 前 体 物 , 进 而合 成 大 分子。                                         合 成 代 谢 的 产 物 大 分 子 化 合 物 是 分 解 代 谢 的 基 础, 分 解 代 谢 的 产 物 又 是 合 成 代谢 的 原 料 , 它 们 在 生 物 体 内 偶 联 进 行 , 相 互 对 立 而 又 统 一 , 决 定 着 生 命 的 存 在和 发 展

★4.试 述 初 级 代 谢 和 次 级 代 谢 与 微 生 物 生 长 的 关 系。
初 级 代 谢 是 微 生 物 细 胞 中 的 主 代 谢 , 它 为 微 生 物 细 胞 提 供 结 构 物 质 , 决 定 微 生物 细 胞 的 生 存 和 发 展 . 它 是 微 生 物 不 可 缺 少 的 代谢。                                                       
次 级 代 谢 并 不 影 响 微 生 物 细 胞 的 生 存 ，它 的 代 谢 产 物 并 不 参 与 组 成 细 胞 的 结 构物 质 。 次 生 代 谢 产 物 对 细 胞 的 生 存 来 说 是 可 有 可 无 的 。 例 如 ,，当 一 个 产 红 色 色素 的 赛 氏 杆 菌 变 为 不 产 红 色 色 素 的 菌 株 后 ，该 菌 照 样 进 行 生 长 繁 殖 。

★6.合 成 代 谢 所 需 要 的 小 分 子 碳 架 有 哪 些 ?
合 成 代 谢 所 需 要 的 小 分 子 碳 架 通 常 有 如 下 十 二 种。
1- P 葡 萄 糖、5-P 核 糖 、PEP 、3-P 甘 油 酸、烯 酸 式 草 酰 乙 酸、乙 酸CoA、     6-P 葡 萄 糖 、4-P 赤 藓 糖、丙 酮 酸、琥 珀 酰 CoA、磷 酸 二 羟 丙 酮 、α-酮 戊 二酸                                                                                                             

★7.微 生 物 的 次 生 代 谢 产 物 对 人 类 活 动 有 何 重 要 意 义 ?
人 类 可 利 用 微 生 物 有 益 的 次 生 代 谢 产 物 为 人 类 的 生 产 , 生 活 服 务：利 用 有 益 抗 生素 防 治 动 植 物 病 害，如 用 青 霉 素 治 疗 人 上 呼 吸 道 感 染 疾 病，用 井 岗 霉 素 防 治 水 稻 纹枯病。                           
利 用 有 益 的 毒 素 , 如 利 用 苏 云 金 杆 菌 产 生 的 伴 胞 晶 体 毒 素 防 治 鳞 翅 目 害 虫；利 用微 生 物 生 产 维 生 素 , 例 如 利 用 真 菌 生 产 维 生 素 B2。利 用 微 生 物 生 产 植 物 生 长 剌激 素 , 如 镰 刀 菌 产 生 的 赤 霉 素 可 促 进 植 物 生 长；利 用 微 生 物 生 产 生 物 色 素 安 全 无毒 . 如 红 曲 霉 产 生 的 红 色 素；还 可 以 利 用 霉 菌 生 产 麦 角 生 物 碱 用 于 治 疗 高 血 压 等病                                                                                                                                         
★10.试 述 细 菌 合 成 脂 肪 酸 的 过 程 。

细 菌 合 成 脂 肪 酸 经 过 以 下 的 反 应 ：

乙 酰 CoA、在 乙 酰 转 酰 基 酶 催 化 下 ，将 乙 酰 基 转 结 ACP：

乙 酰 CoA + ACP → 乙 酰ACP +CoA                                                                    

(2)丙 二 酰CoA 在 丙 二 酰 转 酰 基 酶 催 化 下 ，将 丙 二 酰 基 转 给 ACP：

丙 二 酰CoA + ACP → 丙 二 酰ACP +CoA                                                              

(3)乙 酰ACP 和 丙 二 酰ACP 缩 合 成 乙 酰 乙 酰ACP ，并 放 出 CO2 和 一 分 子 ACP：乙酰ACP + 丙 二 酰ACP → 乙 酰 乙 酰ACP + CO2 + ACP

(4)乙 酰 乙 酰ACP 被 NADPH2 还 原 成 -羟 基 丁酰ACP             

乙 酰 乙 酰ACP + NADPH2 → -羟 基 丁酰ACP                                                 

(5)-羟 基 丁 酰ACP 脱 水 生 成 丁 烯酰ACP                                                                  

(6)丁 烯 酰ACP 被 NADPH2 2还 原 成 丁 酰ACP。                                                       

所 生 成 的 丁 酰ACP 再 与 丙 二 酰ACP 缩 合 ，重 复 上 述 反 应 ，生 成 长 链 的 脂 肪酸。    

★13.以 金 黄 色 葡 萄 球 菌 为 例 , 试 述 其 肽 聚 糖 合 成 的 途 径 。

(1) UDP-NAG 生 成。                                                                                                   

UDP-NAM 生 成。                                                                                                    

上 述 反 应 在 细 胞 质 中 进 行 。

UDP-NAM上 肽 链 的 合 成 。

首 先 ，L-丙 氨 酸 与 UDP-NAM 上 的 羟 基 以 肽 键 相 连 。然 后 D-谷 氨 酸 ，L-赖 氨 酸，D-丙 氨 酸 和 D-丙 氨 酸 逐 步 依 次 连 接 上 去 ，形 成 UDP-NAM-5 肽 。连 接 的 过 程 中 每加 一 个 氨 基 酸 都 需 要 能 量 ，Mg2+ 或 Mn2+等，并 有 特 异 性 酶 参 加 。肽 链 合 成 在 细 胞质 中 进 行。   

组 装 。

UDP-NAM-5 肽 移 至 膜 上 ，并 与 载 体 脂 -P 结 合 生 成 载 体 脂 -P-P-NAM-5 肽，放出 UMP。UDP-NAG 通 过 b-1，4 糖 苷 键 与 载 体 脂-P-P-NAM-5 肽 结 合 生 成 NAG-NAM-5肽-P-P-载 体 脂 ，放 出 UDP。新 合 成 的 肽 聚 糖 基 本 亚 单 位 可 以 插 入 到 正 在 增 长 的 细胞 壁 生 长 点 组 成 中 ，释 放 出 磷 酸 和 载 体脂-P。       

肽 聚 糖 链 的 交 联。

主 要 靠 肽 键 之 间 交 联 。革 兰 氏 阳 性 菌 组 成 甘 氨 酸 肽 间 桥 ，阴 性 菌 由一 条 肽 链上 的 第 4 个 氨 基 酸 的 羟 基 与 另 一 条 肽 链 上 的 第 3 个 氨 基 酸 的 自 由 氨 基 相 连。                

★1．化 能 异 养 微 生 物 进 行 合 成 代 谢 所 需 要 的 还 原 力 可 通 过 哪 些 代 谢 途 径 产 生?

还 原 力 由EM 途 径，HMP 途 径，ED 途 径，TCA 途 径 产生                                                                                                                        

★2．自 然 界 中 的 微 生 物 在 不 同 的 生 活 环 境 中 可 通 过 哪 些 方 式 产 生 自 身 生 长所 需 要 的 能 量 ?

各 种 不 同 的 微 生 物 的 产 能 方 式 可 概 括 为 如 下 几 种：

发 酵 产 能 、呼 吸 产 能 、氧 化 无 机 物 产 能 、靠 光 合 磷 酸 化 产能                                                                        

★3．试 述 多 糖 的 合 成 过 程 。

在 多 糖 合 成 中，通 常 是 以 核 苷 二 磷 酸 糖 ( 如 UDP- 葡 萄 糖 ) 作 为 起 始 物，逐 步加 到 多 糖 链 的 末 端，使 糖 链 延 长 。    

★4．在 TCA 循 环 中 可 为 合 成 代 谢 提 供 哪 些 物 质 ?

EMP 途 径 能 为 合 成 代 谢 提 供 哪 些 物 质 ?

HMP 途 径 可为 合 成 代 谢 提 供 哪 些 物 质 ?

ED 途 径 可 为 合 成 代 谢 提 供 哪 些 物 质 ?

TCA 循 环 可 提 供：GTP ，NADH2，NADPH2， FADH2，小 分 子 碳 架 (a- 酮 戊 二 酸 ,乙 酰 CoA , 琥 珀 酰 CoA , 烯 醇 式 草 酰 乙 酸)              

EM 途 径 能 为 合 成 代 谢 提 供：ATP ，NADH2 ，小 分 子 碳 架 ( 6-葡 萄 糖 , 磷 酸 二羟 丙 酮 , 3-P甘 油 酸 , PEP , 丙 酮 酸)                            

HMP 途 径 可 为 合 成 代 谢 提 供：NADPH2，小 分 子 碳 架 ( 5-P 核 糖 , 4-P赤 藓 糖)                                                        

ED 途 径可 提 供：ATP，NADH2，NADPH2，小 分 子 碳 架 ( 6-P葡 萄 糖，3-P甘 油酸，PEP，丙 酮 酸 )  

★5．举 例 说 明 微 生 物 的 几 种 发 酵 类 型 。

微 生 物 的 发 酵 类 型 主 要 有 以 下 几 种：

乳 酸 发 酵 , 如 植 物 乳 酸 杆 菌 进 行 的 酸 泡 菜 发 酵。                 

乙 醇 发 酵 : 如 酵 母 菌 进 行 的 酒 清 发酵。                             

丙 酮 丁 醇 发 酵 : 如 利 用 丙 酮 丁 醇 梭 菌 进 行 丙 酮 丁 醇 的 发 酵 生产。                                                                                                                                                 
丁 酸 发 酵 : 如 由 丁 酸 细 菌 引 起 的 丁 酸 发 酵。

★6.比 较 呼 吸 作 用 与 发 酵 作 用 的 主 要 区 别 。

呼 吸 作 用 和 发 酵 作 用 的 主 要 区 别 在 于 基 质 脱 下 的 电 子 的 * 终 受 体 不 同 ,发 酵 作 用 脱 下 的 电 子 * 终 交 给 了 底 物 分 解 的 中 间 产 物。呼 吸 作 用 ( 无 论 是 有 氧 呼吸 还 是 无 氧 呼 吸 ) 从 基 质 脱 下 的 电 子 * 终 交 给 了 氧。( 有 氧 呼 吸 交 给 了 分 子 氧 ,无 氧 呼 吸 交 给 了 无 机 氧 化 物 中 的 氧 )

★8.试 述 E.coli 细 胞 中 由a- 酮 戊 二 酸 合 成 谷 氨 酰 胺 的 过 程 。
分 成 两 步 进 行 。首 先 由α-酮 戊 二 酸 经 氨 基 化 作 用 形 成 谷 氨 酸 ：

谷 氨 酸 脱 氢 酶

α-酮 戊 二 酸 + NH3 + NADPH2 ———————— 谷 氨 酸 + H2O +NADP        

第 二 步 是 谷 氨 酸 再 经 氨 基 化 形 成 谷 氨 酰 胺 ：

谷 氨 酰 胺 合 成 酶

谷 氨 酸 + NH3 + ATP ———————→ 谷 氨 酰 胺 + ADP + Pi

第六章  微生物的生长

★⒉什么叫典型生长曲线？它可分几期？划分的依据是什么？

定量描述液体培养基中，微生物群体生长规律的实验曲线，称为生长曲线。

分为延滞期、指数期、稳定期和衰亡期。

根据它们每小时分裂次数的不同。

★⒊延滞期有何特点？如何缩短延滞期？

** 生长速率常数为0 **细胞形态变大或增长 第三 细胞内的RNA尤其是rRNA含量增高，原生质呈嗜碱性 第四合成代谢旺盛 第五 对外界**条件如NaC1溶液浓度、温度和***等理、化因素反应敏感。

** 用对数期的菌种接种 ** 接种量适量增大 第三 发酵培养基成分和种子培养基的成分尽量接近

★⒋指数期有何特点？处于此期的微生物有何应用？

**生长速率常数*大 ** 细胞进行平衡成长 第三 酶系活跃，代谢旺盛

是用作代谢、生理等研究的良好材料，是增殖噬菌体的*适宿主，也是发酵工业中用作种子的*佳材料。

★⒌稳定期为何会到来？有何特点？

因为1微生物有害代谢产物的积累2营养物尤其是生长限制因子的耗尽3营养物的比例失调4pH、氧化还原势等物理化学条件越来越不适宜

特点是生长速率常数等于0，这时菌体产量达到*高点，而且菌体产量与营养物的消耗间呈现出有规律的比例关系。

★⒍连续培养有何特点？为何连续时间是有限的？

**流入新鲜培养基和无菌空气的同时，以同样的流速流出培养物 **，微生物长期

保持在指数期的平衡生长状态和稳定的生长速率上

因为菌种长期处于*高生长速率状态，突变严重，易使菌种退化。

★⒎什么是高密度培养，如何保证好氧菌的高密度培养？

是指微生物在液体培养中细胞群体密度超过常规培养10倍以上的生长状态或培养技术。

方法主要有：1选取*佳培养基成分和各成分含量2补料3提高溶解氧的浓度4防止有害代谢产物的生成

★⒏目前，一般认为氧对***毒害的机制是什么？

氧分子形成超痒化物阴离子自由基，超痒化物阴离子自由基因为有基数电子故带负电荷，它既有分子性质，又有离子性质，其性质极不稳定，化学反应能力极强，在细胞内可破坏各种重要生物大分子和膜结构，还可形成其他活性氧化物，故对生物体的毒害非常大。***不能合成SOD不能使超氧阴离子自由基歧化成过氧化氢，因此在氧存在时超痒化物阴离子自由基使***受到毒害。

★⒐微生物培养过程中pH变化的规律如何？如何调整？

升高或降低，加入生理酸性盐或生理碱性盐，作为其培养基成分。

★⒑试比较**、**、防腐和化疗的异同。

**是指采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。

**是指采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体或动、植物有害的病原菌而对被**对象基本无害的措施。

防腐是指利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖的措施。

化疗是指利用对病原菌具有高度毒力而对其宿主基本无毒的化学物质来抑制宿主体体内病原微生物的生长繁殖，借以达到**该宿主传染病的一种措施。

**完全杀死微生物，而其它方法则是抑制微生物的生长繁殖。

★11.影响湿热**效果的主要因素有哪些？在实践中应如何正确对待？
**物体含菌量越高需要**的时间越长2各类空气排出程度，空气要全部排尽3**对象PH，PH<6.0微生物已死亡PH在6.0-8.0之间微生物不会死亡4**对象的体积，大容积培养基**时必须延长**时间5加热与散热速度，会影响培养基成分的破坏程度，应适当控制。

★⒓***对微生物的作用机制分几类？试各举一例。

1抑制细胞壁合成，如：青霉素

2引起细胞壁降解，如：溶葡萄球菌素

3干扰细胞壁，如：多粘菌素

4抑制蛋白质合成，如：红霉素

5抑制DNA合成，如：灰黄霉素

6抑制DNA复制，如：丝裂霉素

7抑制RNA转录，如：放线菌素D

8抑制RNA合成，如：利福平

 

第七章  微生物生态

★1.举例阐述微生物之间的接力关系

微生物之间的接力关系是指微生物在分解纤维素、半纤维素、果胶、蛋白质、淀粉、核酸等大分子复合物时，是由多种微生物类群一步一步逐级分解协同完成的过程。

如纤维素厌氧降解为甲烷和CO2过程就是由多种微生物类群协同接力完成的。纤维素首先被厌氧纤维分解菌分解为纤维二糖，纤维二糖由纤维二糖分解菌分解为葡萄糖，葡萄糖由厌氧性水解**发酵为H2/CO2和乙酸，H2/CO2由氢营养型的甲烷**转化成甲烷，乙酸则由乙酸营养型的产甲烷**转化成甲烷。

★2、举例阐述微生物之间的偏利共栖互生关系。

这种现象是指在一个生态系统中的两个微生物群体共栖，一个群体得益而另一个群体无影响的情况。

如在一个环境中好氧微生物与厌氧微生物共栖时，好氧微生物通过呼吸消耗掉氧气为厌氧微生物的生存和生长创造了厌氧生活的环境条件，使厌氧微生物得以生存和生长，而厌氧微生物的生存与生长对于好氧性微生物来说并无害处。

★3、举例阐述微生物之间的互利共栖互生关系。

这是两个微生物群体共栖于同一生态环境时互为有利的现象。较之双方单独生活时更好，生活力更强。这种互为有利可以是相互提供了营养物质，可以是相互提供了生长素物质，也可以是改善了生长环境或兼而有之。

例如纤维素分解**和固氮**共栖时，可以由纤维素分解**分解纤维素为固氮**提供生长和固氮所需的碳源和能源，而固氮**可以固定氮素为纤维素分解**提供氮源和某种生长素物质，这样互为有利，促进了纤维素的分解和氮素的固定。

★4、举例阐述微生物之间的共生关系。

一种微生物与另一种微生物生长于同一环境中，双方的生命活动互为有利，关系紧密，形成一个特殊的共生体结构，在这个共生体中，两种微生物可以有明确的生理上的分工和协作，在分类上可以形成独立的分类系统，这种关系称为微生物之间的共生关系。

如地衣，就是由藻类与**形成的共生体，两者之间有较明确的分工，藻类通过光合作用，将CO2固定转化为有机物，给**提供碳源和能源，能固氮的藻类还可提供氮源。而**可吸收水分和矿质元素等提供给藻类。

★5、举例说明微生物之间的竞争关系。

竞争关系是指在一个生态环境中存在的两个或多个微生物类群共同依赖于同一基质或环境因素时，产生的一方或双方微生物群体数量增殖速率和活性等方面受到限制的现象。

如在同一个厌氧消化环境中，甲烷八叠球菌和甲烷丝菌都利用乙酸生长和产甲烷，但各自的Km值分别为3mmol/L和0.07mmol/L,因此当环境中有较高乙酸浓度时，由于甲烷八叠球菌对乙酸的亲和力高，生长速率大，几乎只见到甲烷八叠球菌。当乙酸浓度降低时，由于甲烷八叠球菌难以利用低浓度的乙酸，而甲烷丝菌却能很好利用低浓度乙酸而逐渐占优势。

★6、为何说土壤是微生物栖息的良好环境。

因为土壤含有极为丰富的有机质，不时有动植物残体和微生物残体进入土壤，可以为占有绝大多数比例的有机营养型微生物提供所需的碳源和能源。

土壤也含有相当齐全的矿物质元素，可供微生物生长所需。土壤具有适宜于微生物生长的pH值范围，多数土壤pH在5.5-8.5之间，大多数微生物适宜生长pH范围也在这一范围。

土壤不论处于何种通气状况，都可适应微生物生长。

土壤温度变化范围也与微生物的生长适宜温度范围相一致。

因此土壤具有绝大多数微生物生活所需的各种条件，而成为微生物栖息的良好环境。

★7、阐述土壤微生物在土壤肥力培育中的作用。

土壤微生物在土壤肥力培育中起有重要作用。土壤微生物可以将进入土壤的动植物残体以及微生物本身残体分解，形成新的腐殖质物，并逐渐将老腐殖质分解，推动土壤腐殖质的更新，不断改善土壤的物理性状和化学性状。

微生物在生命活动过程中，将无效的营养物转化为有效营养，如氨化作用将有机氮转化为速效氮，无效磷转化为有效磷等等。

微生物在生命活动过程中可合成各种生长剌激物，有助于植物生长。

微生物在生命活动过程中，可合成各种***物质，有利于抑制植物病原菌。

土壤中的固氮微生物还可以将空气中的氮固定为植物可利用的氮素，藻类还是其他土壤生物的先行生物。

★8、为什么说土壤藻类有土壤生物的先行者之称？
因为土壤藻类是光能自养型微生物，它可以光为能源将CO2转化为有机物，这些以藻类细胞形态存在的有机物，在藻类死亡之后，可以被其有机营养型微生物利用作为碳源和能源，其他微生物因此而发育繁衍。
另外土壤藻类中，许多种是能够进行固氮的，将空气中的氮素固定为其他生物可利用的氮源。
因此说土壤藻类是土壤生物的先行者。

★9、研究微生物生态学的意义何在？
由于微生物参与了和推动着物质和能量的生物地球化学循环过程而且在这个过程中参与了不同的活动过程，表现出不同的活动强度，起着非常重要的作用，通过研究微生物生态，掌握其活动规律，便能更好地发挥微生物的作用。
另外，了解微生物在自然界的分布规律，可为人类开发利用微生物资源提供理论依据。
根据微生物生态学原理，可利用微生物对环境的保护作用来修复被污染的环境。
因此微生物生态学的意义巨大。

★10、举例说明微生物与植物之间的共生关系。

微生物与植物之间能够形成一种特殊结构的共生体，而且微生物与植物之间互为对方提供营养物质或生长素物质，促进双方较之单独生长时更为旺盛的生长。

微生物与植物形成的共生体有根瘤，叶瘤和菌根等。根瘤是根瘤菌与豆科植物形成的共生体，根瘤菌在共生体根瘤中利用植物光合作用产生的碳水化合物作生长和固氮的碳源和能源，固定后的氮素除部分用于自己所需外大多输送给植物，而植物则把光合作用产物提供给根瘤菌。如果两者分开，根瘤菌则难以固定氮素，豆科植物则生长**。

★11、试述水田土壤中微生物的生态分布规律。

在水田土壤中，耕作层中微生物数量*多，心土层中*少。

放线菌和**的数量相对比例较少。

**中好氧性**，专性厌氧**和兼性厌氧性**都有广泛分布，而且好氧性**仍比厌氧性**多好多倍，其分布有着各自不同的特点。

★12、举例阐述微生物之间的专一性拮抗关系和非专一性拮抗关系。

一种微生物的生命活动和代谢产物可以抑制另一种微生物的生命活动，甚至杀死另一种微生物的现象称之为微生物之间的拮抗关系。而根据拮抗关系中的专一性，可以分为专一性拮抗关系和非专一性拮抗关系。

例如在酸菜制作和青贮饲料过程中，乳酸菌发酵后产生乳酸，使环境pH下降，这样使得其他不耐酸的微生物受到抑制,这种拮抗关系没有特异的针对性，凡是不耐酸的微生物都会受到抑制，称为非专一性拮抗关系。

另外象放线菌或其他微生物在生命活动中可以产生某种***，这种***只抑制或杀死某些(或某种)微生物，如青霉素只杀死革兰氏阳性**和部分革兰氏阴性**，即不同种类与结构的***选择性地抑制某种微生物。这种拮抗关系称为专一性拮抗关系。

★13、阐述微生物生态系的特点。

微生物生态系统有着不同于其他生态系统的明显特点。

一是微生物生态系统具有多样性，在不同的生态环境中，有着不同的微生物生态系统。其组成成分、数量、活动强度和转化过程等都很不一样，每一个特定的生态环境，都有一个与之相适应而又区别于其它生态环境的微生物生态系统。

二是具有稳定性。在一个特定的环境中，如无强烈的环境因子冲击，一般其组成成分、数量、活动强度和转化过程大体上保持稳定。即使面临一定范围内的环境因子改变压力，也能保持稳定。

三是具有适应性。即面临强大的环境因子改变压力，原有的微生物生态系统受到破坏时，可以诱导产生新的酶或酶系，或发育出新的微生物优势类群，以适应新的微生物生态系统。

四是具有物质流和能量流。即在微生物生态系统中的各微生物类群之间，在物质和能量上具有接力与流动的现象

★14、阐述微生物在不同地域上空的生态分布规律。

在不同地域上空空气中微生物的分布差异很大，城市上空空气中的微生物密度大大高于农村上空的微生物密度，在城市中街道上空的微生物密度大大高于公园上空的微生物密度。

在农村中无植被地表上空的微生物密度高于有植被地表上空的微生物密度，饲养牲畜的畜舍空气中的微生物密度可能是*高的，可达1,000,000-2,000,000个/m3。

一般来说室内空气中的微生物密度高于室外空气中的微生物密度，宿舍中的微生物密度可达20,000个/m3。

陆地上空的微生物密度高于海洋上空的微生物密度。在人迹**的北极上空以及雪山上空的微生物密度很低，甚至难以检测到。

★15、阐述微生物在各类水体间的生态分布规律。

大气水和雨雪中一般微生物数量不高，在长时间降雨过程后期，菌数更少，甚至可达无菌状态。高山积雪中也较少。

江河中微生物的数量和种类各不相同，与流经接触土壤和是否流经城市有关。土壤中的微生物随雨水和灌水排放等进入水体，或悬浮于水中，或附着于水中有机物上，或沉积于江河淤泥中。当江河流经城市时，大量的生活污水、工业有机废水和动植物残体进入水体，不仅带入大量微生物，且微生物可利用进入的有机体而旺盛繁育，数量大增。随着流程增加有机物被分解，微生物数量也逐渐减少。

池塘水一般由于靠近村舍，有机物进入较多，人畜粪便污染机率较高，不仅在数量上较高，且种类也较多。

大型湖泊水体由于其不流动性和周边受湖岸土壤和有机物质进入的影响，一般周边水域中的微生物数量和种类都多于湖泊中心水体。

海洋水体中心的微生物和种类不多，但沿海海岸水体中微生物数量和种类较远洋中心水体要多得多。

★16、举例说明微生物之间寄生关系中的直接接触和代谢物接触两种类型。

一种微生物可以通过直接接触或代谢物接触使另一种微生物寄主受害，乃至个体死亡，而使它自己本身得益并赖以生存，这种现象为微生物之间的寄生关系。

直接接触的类型如噬菌体侵染**，尤其是毒性噬菌体，侵染并进入**细胞后，利用**细胞内的物质，按噬菌体本身的遗传信息，合成噬菌体的大分子，再装配成成熟的噬菌体，而*后将**细胞裂解。代谢物接触的类型如粘**对**的寄生，粘**并不直接接触**，而是在一定距离外，依靠其胞外酶溶解敏感菌群，使敏感菌群释放出营养物质供其生长繁殖。
 

第八章  微生物与自然界物质转化

★1、试述微生物对淀粉的分解。

微生物对淀粉的分解有两种方式。一种是在微生物产生的磷酸化酶的作用下，将淀粉中的葡萄糖分子一个一个地分解下来。

另一种是在微生物产生的淀粉酶的作用下，将淀粉水解为麦芽糖，再在麦芽糖酶的作用下将麦芽糖水解为葡萄糖。

★2、试述微生物分解纤维素的生化机制。

纤维素是由葡萄糖聚合成的高分子化合物，每个纤维素分子含有1，400－10，000个葡萄糖基。

纤维素的分解是在微生物产生的C1酶，Cx酶和纤维二糖酶的作用下*后被分解为葡萄糖，其过程如下：

天然纤维素羧甲基纤维素纤维二糖葡萄糖

★3、 试述果胶的分解过程。

果胶物质在微生物产生的原果胶酶，果胶甲基酯酶，多缩半乳糖酶的作用下进行分解，其分解过程如下：

果胶物质在微生物产生的原果胶酶，果胶甲基酯酶，多缩半乳糖酶的作用下进行分解，其分解过程如下：

原果胶+H2O可溶性果胶+多缩戊糖

可溶性果胶+H2O果胶酸+甲醇

果胶酸+H2O半乳糖醛酸

★4、 比较正型乳酸发酵与异型乳酸发酵的异同。

正型乳酸发酵与异型乳酸发酵都是在厌气条件下进行的。

正型乳酸发酵产物单一，在发酵过程中产生的能量较多。1分子葡萄糖经正型乳酸发酵后可产2分子的乳酸和2分子的ATP。

异型乳酸发酵产物较多，发酵过程中产生的能量较少。1分子的葡萄糖经异型乳酸发酵后可产生1分子乳酸，1分子乙醇，1分子CO2和1个AT?

正型乳酸发酵乳酸的得率较高，通常在80％以上。异型乳酸发酵乳酸得率较少，一般只有40％左右。

正型乳酸发酵与异型乳酸发酵所走的代谢途径不一样。正型乳酸发酵走EM途径；异型乳酸发酵走ED途径。

★5、试比较柠檬酸发酵与酒精发酵的异同。

柠檬酸发酵与酒精发酵虽然都称为发酵，但前者是在好气条件下进行的，后者是在厌气条件下进行的。

1分子的己糖在好气条件下经过柠檬酸发酵可产1分子的柠檬酸。

1分子的己糖在厌气条件下被酵母菌进行酒精发酵可产2分子的乙醇和2分子的CO2。

参与柠檬酸发酵的微生物主要是曲霉等好气微生物，而参与酒精发酵的微生物是酵母菌。

★6、比较硫化作用和反硫化作用的区别。

硫化作用和反硫化作用的区别主要是:硫化作用是在好气条件下进行的，而反硫化作用在厌气条件下进行的。

硫化作用是将元素硫和不完全氧化的硫化物进行氧化，*后生成硫酸盐。反硫化作用是将硫酸盐和其它氧化态的硫化物还原为H2S。

参与硫化作用的微生物主要是好气性的硫化**，丝状硫**和光合硫**。参与反硫化作用的微生物主要是厌气性的脱硫弧菌等反硫化**。

★7、比较硝化作用和反硝化作用的区别。

硝化作用和反硝化作用的主要区别如下:

硝化作用是在好气条件下进行的，而反硝化作用是在厌气条件下进行的。

参与硝化作用的微生物是亚硝酸**和硝化**，参与反硝化作用的微生物是反硝化**。

硝化作用是将NH3氧化为HNO2和HNO3，反硝化作用是将HNO3还原为HNO2，NH3和N2。

★8、试述微生物对卵磷脂的降解作用。

卵磷脂是含胆碱的磷酸脂,存在于细胞原生质中。卵磷脂的降解首先由微生物产生的卵磷脂酶将其分解为甘油，脂肪酸，磷酸和胆碱。?

甘油进入EM途径被转化为丙酮酸。?

脂肪酸通过β-氧化被分解为乙酸。胆碱可进一步分解为NH3，CO2和有机酸。

★9、试述微生物对脂肪的降解。

脂肪首先在微生物产生的脂肪酶的作用下,被降解为甘

油和脂肪酸。

甘油是己糖分解的中间产物之一,可进入EM途径被转化为丙酮酸。

脂肪酸通过β--氧化途径被逐渐分解成乙酸。

★10、试述微生物对核酸的降解过程。

核酸在微生物产生的多种酶的作用下，可*后被分解为磷酸、核糖、NH3、CO2和水，其降解过程如下：

核酸酶核苷酸酶?

核酸核苷酸?

+H2O

生成的嘌呤或嘧啶继续分解，如腺嘌呤的分解如下：

腺嘌呤脱氨酶

腺嘌呤次黄嘌呤+NH3

H2O?

次黄嘌呤+O2尿酸

★11、试述微生物分解尿酸的过程。?

尿酸+H2O+1/2O2尿囊素+CO2

尿囊素+2H2O尿素+乙醛酸，

尿素+2H2O(NH4)2CO3?

尿酸在微生物产生的多种酶的作用下，可*后分解成NH3和CO2。其分解过程如下：

尿酸+H2O+1/2O2尿囊素+CO2

尿囊素+2H2O尿素+乙醛酸，

尿素+2H2O(NH4)2CO3，生成的(NH4)2CO3不稳定,被进一步分解成NH3和CO2。

(NH4)2CO32NH3+CO2+H2O

★12、试述氨氧化为硝酸的过程。

氨氧化为硝酸分两个阶段完成.**阶段氨氧化为亚硝?

酸,由亚硝酸**进行。其生物化学过程如下:?

NH3NH4OHNH2OH?

HNONH(OH)2HNO2?

**阶段亚硝酸进一步氧化为硝酸,由硝酸**进行:HO-N=O

★13、试述硝化作用和反硝化作用对农业生产的影响。

施入土壤中的氨态氮肥在硝化**的作用下可转化为硝酸盐。这对于那些喜硝酸盐的作物如**，蔬菜来说是有益的。

但硝酸根离子不能被土壤颗粒吸附,易随水分运动而损失，从这一点来讲，它对农业生产又是不利的。

反硝化作?用能将硝酸盐还原为NH3或分子N2，造成土壤氮素的损失，它对农业生产是不利的。

★14、比较糖代谢梭菌与蛋白水解梭菌的主要区别。

糖代谢梭菌主要以简单或复杂的糖类为主要碳源。

蛋白水解梭菌水解蛋白质时可产生多种氨基酸，两个氨基酸相互反应，一个为电子给体，一个为电子受体，进行发酵作用脱氨基产生脂肪酸。

★15、磺颗粒四个方面试比较丝状硫**,硫化**,绿硫**和紫硫**的主要区别。?丝状硫**，硫化**，绿硫**和紫硫**的主要区别?

如下：?

紫硫**?绿硫**?丝状硫**?硫化**??

形态多样?形态多样?丝状体无分枝?短杆菌?个体形态?

存在含H2S的水体中?存在含H2S的水体中?存在含H2S浓度不大的水体中?存在含还原态硫化物的土壤和河湖淤泥中?生境?

兼营光能自养和光能异养?严格的光能无机营养型?化能无机营养型?化能无机营养型?营养类型?硫磺颗粒在体内?硫磺颗粒在体外?细胞内积累硫磺颗粒?体内未见硫磺小滴?元素硫颗粒沉积位置?
 
第十章 实验

★1.试述在普通光学显微镜下测定微生物细胞大小的基本方法。

测定微生物细胞的大小主要使用目镜测微尺。其方法如下:

先用长度已知的镜台测微尺校正目镜测微尺。校正的方法是让台尺与目尺重叠,看台尺的X格正好与目尺的Y格重叠，然后用计算目尺每格的长.分别校正目镜测微尺在低倍镜,高倍镜及油镜下每格所代表的实际长度。

将待测微生物制成水浸片或染色涂片置载物台上，调焦找到微生物后用目镜测微尺测量其宽几格，长几格,然后乘上相应放大倍数下的校正值。

一般测10个微生物，然后以平均值表示。

若是酵母、**等单细胞微生物,通常测其宽和长，然后以平均宽′平均长表示,单位为μm。

★2、以测苏云金杆菌工业菌粉中的活菌数为例，试述稀释平板计数的基本方法。

（1）.测数前先准备好测数用的1ml无菌吸管,9cm无菌平皿，9ml试管无菌水和牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。

(2).称取10克工业菌粉加入90ml无菌水中置摇床上或用手振荡20-30分钟，让菌体分散。

将上述振荡过的菌液按无菌操作法进行十倍稀释直到10-8。

取9cm无菌平板皿9套用记号笔在平皿底编号，10-8编3套，10-7编3套，10-6编3套。

用1支1ml的无菌吸管，取1ml10-8的稀释菌液放入编号10-8的平皿中，如此将三个重复做完。同法取10-7稀释菌液放入三个编号为10-7平皿中。同法取10-6稀释菌液放入三个编号为10-6平皿中.(均要按无菌操作法做)。

将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基熔化冷至45-50℃后，在酒精灯火焰边按无菌操作法倒入上述9套平皿中，每个加入量大约15-20ml，边加边摇动平皿,，使培养基与菌液充分混匀。

待培养基凝固后,将平板倒过来，置28-30℃下培养48小时后计数。

★3、试述划线分离的操作方法。

1.  取9ml无菌平皿一套在火焰旁按无菌操作法倒人15-20ml营养琼脂，让其冷凝成平板。

2.左手拿上述平板,右手拿接种环在火焰上**后沾取原始分离物在平板上平行划线三条。

3.将接种环在火焰上**,左手平板转动大约70度，用**接种环通过**次划线的地方作二次划线，亦划三条。

同上法再作第三次,，第四次划线。

盖上平板盖，将平板倒过来置28-30℃下培养2-4天后观察结果。划的好应在第四次划线处出现单个菌落。

注:本答案也可画图说明。

★4、如何检查**的运动性?

检查**的运动性有两种方法:

镜检法

将待检样品制成菌悬液,滴一点菌液于一盖玻片上，取一凹窝载玻片，将凹窝对准菌悬液盖在盖玻片上，然后将盖玻片和载玻片一起翻转，让菌悬液在凹窝上的盖玻片下。然后在显微镜下观察，观察应找悬液的边缘，因**为了更多地接触空气，总向水滴的边缘运动。观察时要注意将**的运动与分子的布朗运动区别开。

半固体穿刺法

将待检**穿刺接种在半固体试管培养基中,若**仅沿穿刺线生长,说明**不运动。若**沿穿刺线向周围扩散生长,说明**有运动性。

★5、简述配制培养基的基本原则:

培养基是人工配制的供不同微生物生长繁殖，或用于积累代谢产物的营养基质。所以配制培养基时应注意以下原则：

1.  根据微生物的不同选用不同的培养基，以满足微生物对营养物的需要。如自养型微生物所要求营养较简单，而异养型微生物营养要求较复杂。培养**，放线菌，**等各有不同的培养基。

2.  注意各种营养物质的浓度与配比。微生物生长所需要的营养物质往往在适当时才生长良好。浓度大往往会抑制微生物的生长。如糖类，各种重金属盐类如果浓度太高，也会影响微生物的生长。同时各种营养物质的浓度比也应注意，特别是C/N比。

3.  注意将培养基的pH值控制在一定范围内。为了防止因微生物生长繁殖或积累代谢产物后影响培养基pH值，常在其中加入磷酸盐，碳酸盐，以维持培养基pH值的相对恒定。

同时还应考虑培养基的氧化还原电位及原材料的经济、易购和来源广泛的原则。

★6、试述配制培养基的基本过程及应该注意的问题。

配制培养基的基本过程是:

按培养基的配方称取各种药品，用量太少的药品应配制成溶液后再取一定量加入。

将各种药品加水溶解，通常是加所需水量的一半。

若配固体培养基，按2%的用量称取琼脂，用水将琼脂浸湿一下，用手挤去琼脂中过多的水分，加入2的溶液中。

加热至琼脂全部溶解，并补足所需的全部水量。

用1molNaOH和1molHCL调节pH至要求值。

用分装器将培养基分装入试管或三角瓶中，塞上棉塞并包扎，**后备用。

注意事项:

配制过程中，在加热熔化琼脂时，要不断搅拌，以防糊底。

分装时不要让培养基沾染试管口或瓶口，以防培养过程中容易污染杂菌。

★7、试述显微计数的基本方法。

显微计数通常用来测微生物单细胞的数量，大一点的细胞如酵母菌用血球计数板，小一点的细胞如**用**计数板。该测数方法不能区别死活细胞，测出的是微生物总的细胞数量。

血球计数板和**计数板构造相似，计数区的面积都是1mm2，两者的差别在于血球计数板的深度为0.1mm。**计数板的深度为0.02mm。无论是血球计数板还是**计数板计数区都划为25个大方格，每个大方格又划为16个小格。所以每小格的体积为1/4000mm3或1/20000mm3。

计数时,先在显微镜下找到计数区，然后将菌液稀释到适当浓度，取少量菌液滴在计数区上盖上特制盖玻片，亦可先盖盖玻片。然后用吸管将菌液从计数板上的沟里加入。靠菌液的表面张力充满计数区。

计数时采取五点取样法数数，即四角各取一个大方格，再在中央取一个大方格。计数时大方格四周压线的细胞只数两边，以防增加数量。

将5个大方格的菌数加起来除以80得出每个小格的菌数，再乘以4000即为1mm3的菌数，再乘上1000即为1ml的菌数，乘上稀释倍数即为样品含菌数。

★8、标本片上的某一物象，**次看到后如何再次找到它?

要做到这一点，首先取决于显微镜的好坏，若显微镜上的推动器带有纵横标尺，很容易做到这一点。首先记住标本片放到推动器上的方向，然后记下观察某一物体时推动器上的纵横标尺的数字。如纵3，横4。

当标本片拿下来后，若要重复观察原来的物象，只要按原方向将标本片荚在推动器上，将推动器推动到**次观察该物体的纵，横标尺数字纵3，横4，即可看到**次观察过的物体。

★10革兰氏染色反应的成败关键是什么?为什么革兰氏染色有十分重要的理论与实践意义?

因通过革兰氏染色，可把几乎所有的**都分成G＋和G－菌两大类**，在细胞结构、成分、形态、生理、生化、遗传、**、生态和**敏感性等方面都呈现出明显的差异。因此，任何**只要通过革兰氏染色，即可提供不少重要的生物学特性方面的信息。

革兰氏染色反应的成败关键是:

菌龄:12-24小时的纯培养物。

革兰氏染色操作时，要严格控制酒精脱色时间，菌液涂布均匀而薄。

培养基的组成。

★11、如何从土壤中分离得到一个微生物的纯培养体?

首先要根据分离对象选择适宜的培养基。若要分离**应选用马丁-孟加拉红选择培养基；若要分离**应选用牛肉膏蛋白胨培养基；若要分离放线菌应选用高氏培养基。

土样采回来后，用常规的十倍稀释分离法进行稀释分离，若分离**，一般稀至10-8,若分离放线菌,一般稀至10-6；若分离**，一般稀至10-4。取*后三个稀释度倒平板获得单个菌落。

将平板上出现的单菌落转接斜面培养，同时镜检菌体的纯度，若不纯，应将培养的单菌落斜面再次进行稀释分离。倒平板获得单菌落，转接斜面培养，同时镜检菌体的纯度。反复几次直到得到菌体单一的单菌落方可认为是某一微生物的纯培养体。

★12、察氏培养基的组成为:蔗糖:30克,磷酸氢二钾:1.0克,硝酸钠:2克,硫酸镁0.5克,氯化钾:0.5克,硫酸亚铁:0.01克,蒸馏水:1000ml.试述:

该培养基的C源,N源各是什么物质。

除C源和N源外的其它物质起什么作用:

该培养基为什么不加生长因子?

该培养基的C源物质是蔗糖，N源物质是硝酸钠。

1.   磷酸氢二钾、硫酸镁、氯化钾、硫酸亚铁为该培养基提供矿质营养。蒸馏水提供水分。

2.  该培养基培养的微生物在培养基上能合成自身所需的全部生长因子，故无需添加生长因素,该培养基所培养的微生物为野生型。.
 

★2．地衣能在十分贫瘠的环境中生存。如何理解这个问题？用你学习过的有关
微生物生态学的知识解释这种现象（6分）
共生关系
生理上共生：共生菌从基质中吸收水分和无机养料，共生藻类进行光合作用，合成有机物。
结构上共生：形成有固定形态的叶状结构，**无规则的缠绕藻类细胞。
评分标准：共生关系（2分）
生理共生（2分）每划线处1分
结构共生（2分）每划线处1分

★3．论述微生物与水体富营养化的关系，对此类污染该如何防治？（7分）
水体大量的有机物或无机物→水的富营养化→引起藻类大量生长，产生大量有机物→引起异氧微生物大量生长，氧化有机物，耗氧→引起***生长代谢，分解含硫化合物产生H2S→ 引起水体变味、鱼类死亡。
防治：加强环保，减少污染物排放。
评分标准：每划线处1分

★4．吞噬细胞是如何消除感染人体的病原微生物的？简述吞噬作用的可能结果（6分）。
病原体 → 吞噬细胞 → 吞噬体 → 与溶酶体结合为吞噬溶酶体 → 水解酶杀死病原微生物
结果：1 完全吞噬， 2 不完全吞噬。
评分标准：每划线处1分

★5．热力**法中*常用的方法是什么？简述**原理、所用仪器名称、**条件、**适用范围、使用注意事项等（8分）。
                                             评分标准
*常用方法：高压蒸汽**法                   （1分）
原理：高温：DNA变性、蛋白质变形、膜结构破坏。 （3分）每划线1分
仪器：高压蒸汽**锅                         （1分）
**条件：常规： 121.3℃，15-20min          （1分）
         特殊：113（115℃），20-30min       每划线0.5分
使用范围：耐热物品                            （1分）
注意事项：排净冷空气                          （1分）
          不要过于拥挤

 
★46.试述显微计数的基本方法。

显微计数通常用来测微生物单细胞的数量,大一点的细胞如酵母菌用血球计数板,小一点的细胞如**用**计数板。该测数方法不能区别死活细胞,测出的是微生物总的细胞数量。

血球计数板和**计数板构造相似,计数区的面积都是1mm2,两者的差别在于血球计数板的深度为0.1mm。**计数板的深度为0.02mm。无论是血球计数板还是**计数板计数区都划为25个大方格,每个大方格又划为16个小格。所以每小格的体积为1/4000mm3或1/20000mm3。计数时,先在显微镜下找到计数区,然后将菌液稀释到适当浓度,取少量菌液滴在计数区上盖上特制盖玻片,亦可先盖盖玻片。然后用吸管将菌液从计数板上的沟里加入。靠菌液的表面张力充满计数区。计数时采取五点取样法数数,即四角各取一个大方格,再在中央取一个大方格。计数时大方格四周压线的细胞只数两边,以防增加数量。将5个大方格的菌数加起来除以80得出每个小格的菌数,再乘以4000即为1mm3的菌数,再乘上1000即为1ml的菌数,乘上稀释倍数即为样品含菌数。  

★47.微生物有哪些共同特性？试举例分析其利弊。

微生物的共同特性有:A.个体微小,结构简单;B.代谢活跃,方式多样;C.繁殖快,易变异;D.抗性强,能休眠E.种类多,数量大;F.分布广,分类界级宽。例如,微生物繁殖快,代谢活跃,在发酵工业上具有重要的实践意义,主要体现在它的生产效率高,发酵周期短上。同时可利用微生物易变异特性,来提高发酵产物的产量。另外对生物学基本理论的研究也带来极大的优越性,因微生物繁殖快,科研周期大大缩短,经费减少,效率提高。微生物也给人类带来不利的一面,如微生物繁殖快致使物品容易霉腐。微生物还可引起动植物和人的病害。又因微生物易变异,给菌种保藏工作带来一定的难度。

★48.比较硝化作用和反硝化作用的区别; 试述硝化作用和反硝化作用对农业生产的影响。

硝化作用和反硝化作用的主要区别如下:硝化作用是在好气条件下进行的,而反硝化作用是在厌气条件下进行的；参与硝化作用的微生物是亚硝酸**和硝化**,参与反硝化作用的微生物是反硝化**；硝化作用是将NH3氧化为HNO2和HNO3,反硝化作用是将HNO3还原为HNO2,NH3和N2。

硝化作用和反硝化作用对农业生产的影响:施入土壤中的氨态氮肥在硝化**的作用下可转化为硝酸盐。这对于那些喜硝酸盐的作物如**,蔬菜来说是有益的。但硝酸根离子不能被土壤颗粒吸附,易随水分运动而损失,从这一点来讲,它对农业生产又是不利的。反硝化作用能将硝酸盐还原为NH3或分子N2,造成土壤氮素的损失,它对农业生产是不利的。

★49.试述泡囊丛枝菌根的特征和菌根对植物的有益功能。

泡囊丛枝菌根的特征是:1.菌根菌是无隔膜的藻状菌;2.在皮层细胞内形成丛枝或二分叉的菌丝体;3.在皮层细胞内或皮层细胞间形成椭圆形泡囊;4.菌丝除在植物根细胞内形成上述构造外还伸延到士壤中去,有时很旺盛,从而扩大了吸收面,但并不形成外生菌根那样的菌套(菌丝形成的、包在根外面的假薄皮组织)。

菌根对植物有如下有益功能:1.可以增大植物的吸收面。2.可以增加植物对矿质营养的吸收,特别是P素营养的吸收。3.可以帮助豆科植物增强固氮作用。4.可以帮助兰科植物的种子萌发。5.可以增强植物的抗逆性。

★50.阐述土壤中微生物的数量和生物量；试分析土壤中微生物的区系。

土壤中微生物的数量和生物量：生活在土壤中的各种向生物,它们各自有不同的生理习性,产主各种作用。由于各种土壤给予微生物的生活条件的差异,其中微生物群的组成成分和数量各不相同。一克肥土中含的几亿至几十亿微生物。贫瘠土壤每克也含有几百万至几千万个微生物。土壤中微生物的数量以**为*多,放线菌和**类次之,藻类和原生动物等的数量较小。

土壤中微生物的区系：土壤微生物区系的季节性变化是强烈的。温度、湿度和有机质的供应状态是土壤微生物区系的季节性变化的外因。土壤微生物随着植物生长季节的变化,在一年四季中,土壤中有机质的状态和数量变化很大,因而明显地改变着微生物的养料条件。在植物旺盛生长的季节,根系的脱落物产和分泌物是土壤微生物的主要有机养料,秋后一年生植物死亡和多年生植物的脱落物提供了土壤微生物大量有机养料。显然一年中进入土壤的有机物质质量和数量上都不是一样的,因此它们能够供养的微生物种
类和数量也是变化着的。

★1.简述配制培养基的原则和步骤
配制培养基的原则：①目的明确；②营养协调；③理化适宜；④经济节约。配制培养基的步骤：原料称量、溶解（加琼脂）→（过滤）→ 定容 → 调pH → 分装→ 加棉塞、包扎 → **→（摆斜面）→无菌检查

★1.为什么说土壤是微生物生长发育的良好环境
答：土壤是微生物生活的*良好环境，土壤有微生物生活的大本营之称号，主要是由于以下几个方面的原因：岩石中含有铁、钾、镁等多种矿质元素，一般都能满足微生物生长的需要。耕地土壤中各种动植物有机残体和有机肥料是绝大多数微生物良好的营养和能量来源。有大小不同的孔隙，小孔隙的毛细管作用强，经常充满水分，大孔隙中常为土壤空气。此外，土壤的pH值多在4～8.5之间，而且土壤的保温性和缓冲性都比较好。

★2.根际微生物对植物生长有哪些影响?
答：根圈微生物对植物生长的有益影响：改善植物的营养；根圈微生物分泌的维生素、氨基酸、生长刺**等生长调节物质能促进植物的生长；.根圈微生物分泌的**素等物质，有利于作物避免土著性病原菌的侵染；产生铁载体。不利影响：引起作物病害；某些有害微生物虽无致病性，但它们产生的有毒物质能抑制种子的发芽、幼苗的生长和根系的发育；竞争有限养分。

　★2.比较根霉与毛霉的异同?
（1）根霉有假根、匍匐菌丝，囊轴基部膨大成囊托，无囊领，分解淀粉和蛋白质
（2）无假根，中轴纤细，无囊托，孢子囊破裂后有痕迹—囊领，分解淀粉和蛋白质
★4.湿热**比干热**效率高的原因?
湿热**法主要是通过热蒸汽杀死微生物，蒸汽的穿透能力较热空气强，且蛋白质含水量越高，越易于凝固，并且湿热**只要120～121℃10min就可以引起微生物的死亡，干热**要在干燥下160～170℃1～2h。
★3、描述烈性噬菌体侵染寄主的过程
答：烈性噬菌体侵染寄主的过程包括五个主要的过程①吸附;当噬菌体与其相应的特异宿主在水中发生偶然想碰后,若尾丝**与宿主细胞表面的特异受体接触,则尾丝被刺激散开而附着在受体上;②侵入;吸附后基板获得一个构象刺激,尾端的容菌酶水解细胞壁的肽聚糖使**头部的核酸注入宿主细胞;③增殖;**将其核酸注入宿主细胞后,利用宿主细胞的物质作为自己合成的物质来源进行大量的繁殖;④装配即成熟;噬菌体将自己在宿主细胞体内合成的各种部件进行有序的装配,形成完整的子代噬菌体;⑤裂解即释放;当宿主细胞内的大量子代噬菌体成熟后,由于水解细胞膜的脂肪酶和水解细胞壁的溶菌酶的作用,促使细胞裂解从而完成了子代噬菌体的释放.
.微生物与人类的关系
   生活在自然界中的微生物，绝大多数对人类和动植物的生存是无害的。例如，如果没有微生物把有机物降解成无机物并产生大量的二氧化碳，其结果将是一方面地球上有机物堆积如山（动植物、人的尸体），另一方面，新的有机物将无法继续合成，在这样的生态环境中一切生物将无法生存。
   ★1、人和动物机体内正常情况下存在的微生物群称为正常菌群，微生态学的研究证明，正常菌群对机体具有生理作用、**作用和生物屏障作用。那么在人类的生活和生产活动中，微生物的作用已被广泛应用于各个领域。
2、在工业方面，废物的处理（处理生活中的垃圾，**是专家），制革，石油勘探，酿造以及食品，尤其在***的生产中更是十分重要。
3、在农业方面，可用微生物来制造**肥料，植物生长**以及植物虫害的防治，都与微生物密切相关（利用微生物感染昆虫这一自然现象杀死害虫），近几年微生物还在遗传工程或基因工程中广为利用，例如：噬菌体和**的质粒是分子遗传学中重要载体。限制性核酸内切酶是**的代谢产物，大肠杆菌、酵母是常用的工程菌。存在于自然界微生物也有少数能使人类和动植物发生病害，被称为病原微生物，如：结核杆菌可引起结核病，肝炎病毒可引起病毒性肝炎。
★2、 请描述**锅的工作原理和具体操作方法。（5%）
高压蒸气**的温度越高，微生物死亡越快。高压蒸气**的物品放在一个可密闭的高压蒸气**锅中进行的。具休操作方法如下（7分）：①打开**锅盖，将内层**桶取出，向锅内加水，使水面与三角搁架齐平；②放回**桶，将待**物品放入灭桶内，不要放得太挤，以免影响蒸气的流通而影响**效果；③将盖上的排气软管插入内层灭桶的排气槽内，上下对齐，拧紧螺栓；④加热时，须将排气阀打开，待**锅内水蒸汽形成后，排除**锅内冷空气，尔后，关闭排气阀，使**锅升压至0.3—0.5kg/cm2时，再打开排气阀排气，使**锅压力表降压0kg/cm2时，这样才算锅内冷空气彻底排除，*后再关闭排气阀，升压至所需要的压力，控制热源，准持衡压至**锅所需要的时间；⑤**所需时间到后，停止加热，压力随之下降，打开排气阀，再松动螺检，打开盖子，取出**物品。